病理標本的(de)一種，制作時將部分(fen)有病變的組織或臟器經過各種化學品和埋(mai)藏法的處理(li)，使之固定(ding)硬化，在切片機(ji)上(shang)切成薄片，粘附(fu)在玻片上(shang)，染以各種顏色，供(gong)在顯(xian)微鏡(jing)下檢查，以觀察病理(li)變化，作出病理(li)診斷，為臨床診斷和治療提供(gong)幫助。

病(bing)理切片

　　病理切片的制作

　　1．取材

　　具體要求(qiu)如(ru)下：

　　(1)材料新鮮：取(qu)材組織(zhi)愈新鮮愈好，人體組織(zhi)一般在離體后和動物組織(zhi)在處(chu)死后都應(ying)迅(xun)速(su)固(gu)定，以保證(zheng)原有的形態學結構。

　　(2)組(zu)織(zhi)塊的(de)(de)(de)大小：所取(qu)組(zu)織(zhi)塊較理(li)想的(de)(de)(de)體(ti)積(ji)為2.0cm×2.0cm×0.3cm，以(yi)使固定(ding)(ding)液(ye)能迅(xun)速而均勻地滲入(ru)組(zu)織(zhi)內部，但根據制(zhi)(zhi)片材料和目的(de)(de)(de)不同，組(zu)織(zhi)塊的(de)(de)(de)較理(li)想體(ti)積(ji)也不同，如制(zhi)(zhi)作病理(li)外檢、科研(yan)切片，其組(zu)織(zhi)塊可以(yi)薄取(qu)0.1～0.2cm即可，這樣可以(yi)縮短固定(ding)(ding)脫水透(tou)明的(de)(de)(de)時(shi)間(jian)，若制(zhi)(zhi)作教學(xue)(xue)切片厚取(qu)0.3 ～0.5cm，這樣可以(yi)同一蠟塊制(zhi)(zhi)作出較多的(de)(de)(de)教學(xue)(xue)切片。

　　(3)勿擠(ji)壓(ya)組織(zhi)塊：切(qie)取組織(zhi)塊用的刀(dao)剪要鋒(feng)利，切(qie)割時不可來回銼動。夾取組織(zhi)時切(qie)勿過緊，以免因擠(ji)壓(ya)而使組織(zhi)、細胞變形。

　　(4)規(gui)范取(qu)材部(bu)位(wei)：要(yao)(yao)準確地按(an)解(jie)剖(pou)部(bu)位(wei)取(qu)材，病理(li)標本取(qu)材按(an)照各病變部(bu)位(wei)、性質的不同，根據(ju)要(yao)(yao)求規(gui)范化取(qu)材。

　　(5)選好組(zu)織(zhi)塊的(de)切(qie)(qie)面：根據各器官的(de)組(zu)織(zhi)結構，決定(ding)其切(qie)(qie)面的(de)走(zou)向。縱切(qie)(qie)或橫切(qie)(qie)往往是顯(xian)示組(zu)織(zhi)形態結構的(de)關鍵(jian)，如長管狀器官以(yi)橫切(qie)(qie)為好。

　　(6)保(bao)持材料的清潔(jie)：組織塊(kuai)上如(ru)有血液、污物、粘液、食物、糞便等，可用水(shui)沖(chong)洗干凈后再放入(ru)固定(ding)液中。

　　(7)保持組(zu)織的原有(you)形(xing)(xing)態：新鮮組(zu)織固定后(hou)，或(huo)(huo)多或(huo)(huo)少會產生(sheng)收縮現象，有(you)時甚(shen)至(zhi)完(wan)全變形(xing)(xing)。為此可將組(zu)織展(zhan)平，以盡可能維持原形(xing)(xing)。

　　2．固定

　　(1)小(xiao)(xiao)塊組織固(gu)定法：這是最常(chang)用的方法，從人(ren)體或動(dong)物體取(qu)下的小(xiao)(xiao)塊組織，須立即置入液(ye)態固(gu)定劑中進行固(gu)定。通常(chang)，標本(ben)與固(gu)定液(ye)的比例(li)為1：4～20，但組織塊不(bu)宜過大過厚，否則固(gu)定液(ye)不(bu)能迅速滲透。故取(qu)組織塊的大小(xiao)(xiao)一般(ban)為2.0cm×2.0cm×0.3cm。

　　(2)注(zhu)射、灌(guan)注(zhu)固(gu)(gu)(gu)定(ding)法：某些(xie)組織塊由于體(ti)積過(guo)大或(huo)固(gu)(gu)(gu)定(ding)液極難滲入內部(bu)，或(huo)需要對整個(ge)臟器或(huo)整個(ge)動物體(ti)進行固(gu)(gu)(gu)定(ding)。這(zhe)時(shi)宜采用注(zhu)射固(gu)(gu)(gu)定(ding)或(huo)灌(guan)注(zhu)固(gu)(gu)(gu)定(ding)法。將固(gu)(gu)(gu)定(ding)液注(zhu)入血管，經血管分支(zhi)到達整個(ge)組織和(he)全身(shen)，從而(er)得到充分的固(gu)(gu)(gu)定(ding)。

　　(3)蒸汽固定法：比較小(xiao)而厚的標本，可采(cai)用(yong)鋨酸(suan)或(huo)甲醛(quan)蒸汽固定法。如血(xue)液涂(tu)片，則應在血(xue)片未干燥前采(cai)用(yong)鋨酸(suan)或(huo)甲醛(quan)蒸汽接觸固定。

　　最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇(chun)固定液。

　　3．脫水透明

   標本經過固定和沖洗后，組織中含有較多的水分，必須將組織塊內的水分置換出來，這一過程叫做脫水。無論是用石蠟切片，還是用火棉膠切片，都必須除去組織中所含水分，因含水組織與石蠟、火棉膠等包埋材料不相容，常用的脫水劑為一系列不同濃度的乙醇。

　　脫水(shui)(shui)的步驟是(shi)：80%、90%、95%、100%各種濃度(du)乙醇(chun)2小時，此過(guo)程可用脫水(shui)(shui)機自(zi)控(kong)完成(cheng)。

　　丙酮也是(shi)一(yi)種(zhong)脫(tuo)(tuo)水能力(li)很強的脫(tuo)(tuo)水劑，但因其脫(tuo)(tuo)水能力(li)很強，對組織有(you)(you)劇烈(lie)收(shou)縮作用(yong)，在(zai)制作科研、教學切片時一(yi)般不用(yong)該試劑。因乙醇、丙酮等(deng)不溶于(yu)石(shi)蠟，還(huan)要經過一(yi)個能溶于(yu)石(shi)蠟的溶劑替代過程稱為透(tou)明(ming)。常用(yong)的透(tou)明(ming)劑有(you)(you)二甲苯、三氯甲烷、水楊(yang)酸甲酯(zhi)等(deng)。

　　4．浸蠟、包埋

　　(1)使(shi)石蠟浸入組織中，取代組織中含有的透(tou)明劑(ji)。

　　(2)包(bao)埋：將浸蠟后的(de)(de)組(zu)織置于融化的(de)(de)固(gu)體石(shi)蠟中，石(shi)蠟凝固(gu)后，組(zu)織即(ji)被(bei)包(bao)在其中，稱(cheng)蠟塊，此過程稱(cheng)為包(bao)埋。

　　5．切片和貼片

　　(1)修整蠟塊：可視其(qi)組織(zhi)的大小(xiao)，在組織(zhi)邊(bian)緣(yuan)約0.1～0.2cm處，切去余蠟部分，否則易造成(cheng)組織(zhi)皺縮不(bu)平。

　　(2)準(zhun)備好切(qie)片用具：切(qie)片刀、毛筆、眼科鑷(nie)子（彎）、漂烘溫(wen)控儀。

　　(3)安(an)裝(zhuang)蠟(la)塊：將(jiang)修(xiu)好的蠟(la)塊安(an)裝(zhuang)在(zai)金屬或木(mu)制持蠟(la)器上。

　　(4)安(an)裝切(qie)片(pian)刀(dao)(dao)：將切(qie)片(pian)刀(dao)(dao)安(an)裝在切(qie)片(pian)機的(de)刀(dao)(dao)臺(tai)上，把刀(dao)(dao)臺(tai)上的(de)緊(jin)固螺絲旋緊(jin)，使切(qie)片(pian)時不產(chan)生振動，能保持一定的(de)切(qie)片(pian)厚(hou)度。

　　(5)切(qie)片(pian)的厚度(du)(du)：切(qie)片(pian)機(ji)的厚度(du)(du)調節器上刻有0～50μm或0～25μm，可(ke)任(ren)意選擇其厚度(du)(du)，石蠟切(qie)片(pian)的厚度(du)(du)一般在4～6μm。

　　(6)切片

　　(7)鋪片(pian)：用眼科鑷子鑷起蠟帶輕輕平(ping)(ping)鋪在40～45℃的(de)水(shui)(shui)面上，借水(shui)(shui)的(de)張(zhang)力和水(shui)(shui)的(de)溫度(du)，將略(lve)皺的(de)蠟帶自然展平(ping)(ping)。

　　(8)貼片(pian)、烘片(pian)：待切片(pian)在恒溫(wen)(wen)水面上充(chong)分展平后，將(jiang)蠟片(pian)撈到(dao)載玻片(pian)的(de)中段處傾去載玻片(pian)上的(de)余水，置入60～65℃恒溫(wen)(wen)箱內或切片(pian)漂烘溫(wen)(wen)控(kong)儀(yi)的(de)烘箱內烤片(pian)15～30分鐘(zhong)，脫去溶化組織間隙的(de)石蠟。

　　6．染色和封片

      常用的染色方法是蘇木素-伊紅（Hematoxylin-Eosin）染色法，簡稱H.E染色法。這種方法對任何固定液固定的組織和應用各種包埋法的切片均可使用。蘇木素是一種堿性染料，可使組織中的嗜堿性物質染成藍色，如細胞核中的染色質等；伊紅是一種酸性染料，可使組織中的嗜酸性物質染成紅色，如多數細胞的胞質、核仁等在H.E染色的切片中均呈紅色。

　　H.E染色程序如(ru)下:脫蠟、脫苯(ben)、復水、染色、脫水、透(tou)明(ming)、封固(gu)。

　　常(chang)規蘇木素染(ran)(ran)色(se)中(zhong)的對(dui)比(bi)(bi)染(ran)(ran)色(se)是(shi)用(yong)(yong)伊紅(hong)，近年來(lai)在英(ying)、美國家的一(yi)些(xie)實(shi)驗室則采用(yong)(yong)焰紅(hong)（phloxine），此外也有用(yong)(yong)桔黃G（OrangeG）、比(bi)(bi)布里(li)希猩(xing)紅(hong)(Biebrich scarlet)、波爾多紅(hong)(Bordeaux red)等作為對(dui)比(bi)(bi)染(ran)(ran)  色(se)。伊紅(hong)為染(ran)(ran)胞(bao)質、膠原(yuan)纖維、肌纖維、嗜酸性顆粒等常(chang)用(yong)(yong)的染(ran)(ran)料。