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剛果紅染色在全自動生物組織染色機的應用

時間(jian):2023-10-05


全自動生(sheng)物(wu)(wu)組織(zhi)染色機主要是針對(dui)一些生(sheng)物(wu)(wu)組織(zhi)進行染色,下面小編就(jiu)和大家去介紹一下兩種剛果紅染色法有(you)什么優缺(que)點。

常用的剛果(guo)(guo)紅(hong)染色法有兩種(zhong),一(yi)(yi)種(zhong)是先培養微(wei)生物,再加(jia)入剛果(guo)(guo)紅(hong)進(jin)行顏色反(fan)應,另一(yi)(yi)種(zhong)是在倒(dao)平板時就加(jia)入剛果(guo)(guo)紅(hong)。

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  方法(fa)一: 在(zai)長(chang)出(chu)茵(yin)落的(de)培(pei)養(yang)基上,覆蓋質(zhi)量濃(nong)度為(wei)(wei)1 mg/mI.的(de)CR溶(rong)液(ye),10~15 min后(hou),倒去(qu)CR溶(rong)液(ye),加入(ru)物質(zhi)的(de)量濃(nong)度為(wei)(wei)l mol/I.的(de)NaCI溶(rong)液(ye),15 min后(hou)倒掉NaCl溶(rong)液(ye),此(ci)時,產生纖維(wei)素酶的(de)茵(yin)落周圍將(jiang)會出(chu)現透明圈。

  方法二(er): 配制質量濃度為10mg/mI.的(de)CR溶(rong)液,滅菌(jun)后,按照每200mI培養基加(jia)入1mI的(de)比例(li)加(jia)入CR溶(rong)液,混勻后倒(dao)平板。等培養基上長(chang)出茵落(luo)后,產生纖維素酶的(de)菌(jun)落(luo)周(zhou)圍將會出現明顯的(de)透明圈(quan)。

兩(liang)種剛(gang)果紅染色法的(de)比(bi)較剛(gang)果紅在篩選纖(xian)維素分解菌上的(de)應(ying)用已經有超(chao)過20年(nian)的(de)歷史,課本中給出了兩(liang)種方法。


  方法一: 是傳統的(de)方法,缺點是操作繁瑣,加入剛果(guo)紅溶液會(hui)使菌(jun)(jun)落之間(jian)發生混(hun)雜;其優點是這樣顯示出的(de)顏色反應基本上是纖維素分(fen)解菌(jun)(jun)的(de)作用。


  方法二: 優點是(shi)操作簡便,不存(cun)在(zai)菌(jun)落混(hun)雜問(wen)題,缺(que)點是(shi)由于(yu)在(zai)纖(xian)(xian)維素(su)粉(fen)和瓊脂、土豆汁中(zhong)都含有(you)淀粉(fen)類物質,可以(yi)使能夠產(chan)生(sheng)淀粉(fen)酶(mei)的(de)(de)(de)微(wei)生(sheng)物出現假陽性(xing)反應。但這種(zhong)只產(chan)生(sheng)淀粉(fen)酶(mei)的(de)(de)(de)微(wei)生(sheng)物產(chan)生(sheng)的(de)(de)(de)透(tou)(tou)(tou)明(ming)(ming)圈較為(wei)模糊,因(yin)為(wei)培養基中(zhong)纖(xian)(xian)維素(su)占主要地位,因(yin)此可以(yi)與纖(xian)(xian)維素(su)酶(mei)產(chan)生(sheng)的(de)(de)(de)透(tou)(tou)(tou)明(ming)(ming)圈相區分(fen)。方法二的(de)(de)(de)另(ling)一(yi)缺(que)點是(shi):有(you)些微(wei)生(sheng)物具有(you)降解(jie)色素(su)的(de)(de)(de)能力(li),它(ta)們在(zai)長時間(jian)培養過程中(zhong)會降解(jie)剛果紅而形成明(ming)(ming)顯的(de)(de)(de)透(tou)(tou)(tou)明(ming)(ming)圈,與纖(xian)(xian)維素(su)分(fen)解(jie)菌(jun)不易區分(fen)。